Análisis de LST-1 en la formación de vesículas COPII dependientes de ERV-14 en Neurospora crassa

El crecimiento de hongos filamentos requiere la síntesis continua de proteínas de la pared celular y membrana plasmática (MP). Este proceso tiene lugar en el retículo endoplasmático (RE), donde las proteínas recién sintetizadas se incorporan a vesículas cubiertas con proteínas de revestimiento II (C...

Descripción completa

Detalles Bibliográficos
Autor: Monica Esther Cante Paz
Tipo de recurso: tesis de maestría
Estado:Versión publicada
Fecha de publicación:2024
País:México
Institución:Centro de Investigación Científica y de Educación Superior de Ensenada
Repositorio:Repositorio Institucional CICESE
Idioma:español
OAI Identifier:oai:cicese.repositorioinstitucional.mx:1007/4107
Acceso en línea:http://cicese.repositorioinstitucional.mx/jspui/handle/1007/4107
Access Level:acceso abierto
Palabra clave:info:eu-repo/classification/autor/Neurospora crassa, vesículas COPII, tráfico vesicular, LST-1, ERV-14
info:eu-repo/classification/autor/Neurospora crassa, vesicle trafficking, COPII vesicles, LST-1, ERV-14
info:eu-repo/classification/cti/2
info:eu-repo/classification/cti/24
info:eu-repo/classification/cti/2410
info:eu-repo/classification/cti/230227
Descripción
Sumario:El crecimiento de hongos filamentos requiere la síntesis continua de proteínas de la pared celular y membrana plasmática (MP). Este proceso tiene lugar en el retículo endoplasmático (RE), donde las proteínas recién sintetizadas se incorporan a vesículas cubiertas con proteínas de revestimiento II (COPII). Estas vesículas emergen de la membrana del RE y siguen la ruta secretora hacia su destino final. En Neurospora crassa se ha identificado a ERV-14 como un receptor de carga esencial del RE. En Saccharomyces cerevisiae Erv14p funciona como receptor de carga para algunas proteínas de MP, uniéndose simultáneamente a la proteína de carga y a Sec24p, una proteína de la capa interna de COPII. Análisis anteriores mediante microscopía confocal de barrido láser en hifas de N. crassa han mostrado co-localización parcial de ERV-14 y SEC-24 etiquetadas con proteínas fluorescentes dentro de una red membranosa. En S. cerevisiae Lst1p sustituye a Sec24p en la capa interna de vesículas COPII que exportan como cargas a determinadas proteínas de MP. Sin embargo, aún se desconoce si Lst1p interactúa con receptores de cargas de la familia de Erv14p. En este trabajo, se analizó la distribución y dinámica de LST-1, ortóloga de Lst1p, en hifas en crecimiento de N. crassa, mediante microscopía confocal de barrido láser y microscopía confocal de disco giratorio. Se observó a LST-1-GFP distribuida a lo largo de la célula, aunque más predominantemente en regiones subapicales y distales, en forma de puntos cerca de los núcleos. Se observaron puntos fluorescentes moviéndose a regiones corticales distales, sugiriendo que LST-1-GFP podría participar en una subpoblación de vesículas COPII que viajan directamente a la MP. Las co-expresiones de LST-1-GFP y ERV-14-mCherry mostraron ausencia de co-localización, sugiriendo que LST-1 puede estar interactuando con otros receptores de carga, pero no con ERV-14. Por otro lado, en las co-expresiones de LST-1-GFP y SEC-24-mCherry se observó un patrón de distribución diferente de ambas proteínas. LST-1 se encontró principalmente en regiones distales, mientras que SEC-24 se encontró cerca del ápice. Sin embargo, se encontró co-localización parcial en regiones cercanas al ápice, sugiriendo que ambas proteínas convergen transitoriamente en el mismo organelo.